关于精子存活的研究

1.3.1 DEI值的计算:采用精子染色质结构测定(SCSA)法计算 DI值,使用 Di-0uik 试剂盒(浙江星博生物科技有限公司)处理样品,利用流式细胞仪检测样本,结合FCS Express 流式分析软件计算并记录每个样品精子的情况,每个样品至少分析5 000条精子。正常精子呈现绿色荧光,受损精子呈现红色荧光。DFI=红色荧光数/(红色荧光数+绿色荧光数)x100%。

1.3.2 精子成活率的计算,采用伊红-苯胺黑染色法检测精子存活率,取精液样品与伊红-苯胺黑染色液(南京森贝伽生物科技有限公司)各1滴,混匀并静置 30s,制成薄片,置于显微镜下观察,统计染色精子(未存活精子)数与未染色精子(存活精子)数,计算精子存活率,每个样本至少统计 200条精子。精子存活率=未染色精子数/(染色精子数+未染色精子数)x100%。

1.4 统计学方法 应用SPSS21.0统计学软件处理数据,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用配对样本t检验,计数资料以 n(%)表示,采用X 检验,多因素分析采用 Logistic回归分析,DI值及精子存活率与辅助生殖患者助孕结局的相关性采用 Spearman 分析,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析 DI值、精子存活率及两者联合检测对辅助生殖患者助孕结局的预测价值。以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 研究对象一般资料比较 根据 DFI值可分为A组 108例、B组60 例,根据精子存活率可分为C组121例、D组47例。其中 A、B组间 DFI值、前向运动精子、生化妊娠率( BP)及临床妊娠率(CP)比较,差异具有统计学意义(P<0.05);C、D组间精子存活率、前向运动精子、BP及 CP比较,差异有统计学意义(P<0.05);A、B组间及CD组间男女双方年龄、女方 BMI、精子浓度、促卵泡激素、受精卵子数及流产率比较,无统计学差异(P>0.05)。见表1、2